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为了深入研究差别类型药物的耐药机理， ，，并为新型抗癌药物和疗法的开发提供依据， ，，耐药模子的构建显得至关主要。。。。美高梅接纳药物攻击诱导的要领， ，，构建了赫赛汀耐药模子。。。。
我们接纳“脉冲式（Pulsed）+一连式（Continuous）”的给药攻击方法：
脉冲式给药：单次 4~6 小时的高浓度药物袒露， ，，模拟临床病人治疗时的药物代谢与袒露情形；；；；
后续作育：细胞在低浓度药物条件下继续生长， ，，以维持耐药性；；；；
评价标准：经由多轮药物攻击后获得的耐药细胞模子， ，，将与原始的野生型细胞举行比照， ，，通过体外药敏检测的 IC50 比值（RF 值）评估耐药性， ，，参考McDermott et al.2等研究， ，，将RF值>5作为判断耐药模子构建乐成的标准。。。。
乐成构建体外耐药细胞系后， ，，我们进一步在免疫缺陷小鼠中建设移植瘤模子， ，，研究其成瘤及药物耐受情形。。。。
药物名称：曲妥珠单抗（Trastuzumab）
商用名称：赫赛�。。。。℉erceptin?）
由基因泰克（Genentech）公司开发， ，，于1998年获得FDA审批， ，，用于治疗人表皮生长因子受体2阳性（HER2+）的转移向乳腺癌患者， ，，常与紫杉醇联用， ，，是第一款被批准的酪氨酸激酶抑制剂， ，，也是第一个乐成以生物标记物为指导的癌症药物。。。。
在赫赛汀耐药模子构建方面， ，，美高梅选择了具有ER+/HER2+特征的BT-474人乳腺癌细胞系， ，，通过药物攻击诱导的方法， ，，乐成构建了赫赛汀的耐药模子。。。。
体外药敏检测效果显示， ，，原始野生型IC50值为0.693 μg/mL， ，，耐药型IC50值提高到174.5 μg/mL， ，，RF值为251.8（图2a）。。。。
在体内药效评价实验中， ，，野生型移植瘤模子的肿瘤抑制率（%TGI）值为85.11， ，，耐药型移植瘤的肿瘤抑制率降低为52.57（图2b）。。。。
图 BT-474_赫赛汀耐药模子实验效果
a) 体外药敏检测实验效果；；；；
b) 体内成瘤与药效实验效果
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